Pūnaehana Huina RNA Isolation Kit Huina RNA Isolation Huina Hoʻomaʻemaʻe mai ke kelepona
ʻO ka wehewehe ʻana o ka pahu:
Hiki ke loaʻa ka RNA piha hoʻomaʻemaʻe kiʻekiʻe a kiʻekiʻe loa mai nā ʻano moʻomeheu like ʻole i 11 mau minuke.
RNase-Free
Hana ʻia ma ka lumi wela (15-25 ℃)
Me ka DNA-Cleaning Column
ʻO ka hua RNA kiʻekiʻe
ʻO ka wikiwiki: Hoʻopau i ka unuhi ʻana i 11 mau minuke
Palekana: ʻAʻohe kemika Organic
wehewehe
Ke hoʻohana nei kēia pahu i ke kolamu spin a me ke ʻano i hoʻomohala ʻia e Foregene, hiki iā ia ke hoʻokaʻawale maikaʻi i ka RNA piha maʻemaʻe kiʻekiʻe a kiʻekiʻe mai nā cell i hoʻoulu ʻia ma nā papa 96, 24, 12, a me 6-well.
Hāʻawi ka pahu i kahi kolamu hoʻomaʻemaʻe DNA maikaʻi, hiki ke hoʻokaʻawale i ka supernatant a me ka cell lysate, hoʻopaʻa a wehe i ka DNA genomic.He maʻalahi ka hana a mālama manawa.
Thiki i ke kolamu RNA wale nō ke hoʻopaʻa pono i ka RNA me kahi ʻano hoʻohālikelike.Hiki ke hana ʻia ka nui o nā laʻana i ka manawa like.
Nā ʻāpana pahu
| haku mele | RE-03111 | RE-03114 |
| 50 T | 200 T | |
| Mālama cRL1* | 25 mL | 100 mL |
| Mālama cRL2 | 15 mL | 60 mL |
| Hoʻopaʻa RW1* | 25 mL | 100 mL |
| Hoʻopaʻa RW2 | 24 mL | 96 mL |
| RNase-Free ddH2O | 10 mL | 40 mL |
| RNA-Kola wale nō | 50 | 200 |
| Kona Hoomaemae DNA | 50 | 200 |
| Aʻo | 1 | 1 |
*E ʻoluʻolu e ʻaʻahu i nā mīkina lima a e hana i nā hana pale i ka wā o ka hana ʻana no ka mea aia ʻo Buffer cRL1 a me Buffer RW1 i nā paʻakai chaotropic hoʻonāukiuki.
Nā hiʻohiʻona & pono
■ Hoʻohana ʻia ke kaʻina holoʻokoʻa ma ka lumi wela (15-25 ℃), me ka ʻauʻau hau a me ka centrifugation haʻahaʻa.
■ ʻO ka pahu holoʻokoʻa he RNase-Free, ʻaʻohe pono e hopohopo e pili ana i ka hōʻino ʻana o RNA.
■ Hoʻopaʻa pono ʻia ke kolamu hoʻomaʻemaʻe DNA i ka DNA, i hiki i ka pahu ke hoʻopau i ka ʻino DNA genomic me ka hoʻohui ʻole ʻana i ka DNase hou.
■ Loaʻa RNA kiʻekiʻe: Hiki i ke kolamu RNA-wale a me ka hoʻohālikelike kū hoʻokahi ke hoʻomaʻemaʻe pono i ka RNA.
■ ʻO ka wikiwiki wikiwiki: maʻalahi ka hana a hiki ke hoʻopau i nā minuke 11.
■ Palekana: ʻAʻole koi ʻia ka mea hoʻoponopono organik.
■ Ke kūlana kiʻekiʻe: ʻO ka RNA i hoʻomaʻemaʻe ʻia he maʻemaʻe kiʻekiʻe, ʻaʻohe protein a me nā mea haumia ʻē aʻe, a hiki ke hālāwai me nā hoʻokolohua like ʻole.
Ke noi pahu
He kūpono ia no ka unuhi ʻana a me ka hoʻomaʻemaʻe ʻana i ka nui o ka RNA mai nā cell moʻomeheu i nā papa 96, 24, 12, a me 6-well.
Ka holo hana
Diagram
Ua mālama ʻia ke kiʻi pākaukau agarose gel o ka Cell Total RNA Isolation Kit i nā helu like ʻole o luna, 20μl volume elution, e lawe i ka 2μl i hoʻomaʻemaʻe ʻia i ka RNA 1%.
Ka mālama ʻana a me ka mālama ʻana
Hiki ke mālama ʻia ka pahu no 12 mahina ma ka lumi wela (15–25 ℃) a i ʻole 2–8 ℃ no ka manawa lōʻihi (24 mau mahina).
Hiki ke mālama ʻia ka Buffer cRL1 ma 4 ℃ no 1 mahina ma hope o ka hoʻohui ʻana i ka 2-hydroxy-1-ethanethiol (koho).
ʻAʻole lawe ʻia ka RNA a i ʻole nā hua RNA
Nui nā ʻano like ʻole e pili ana i ka pono o ka hoʻihoʻi hou ʻana, e like me: kiko kiko RNA maʻiʻo, ke ʻano o ka hana, ka nui elution, etc.
1. Hana ʻia ka ʻauʻau hau a i ʻole cryogenic (4 °C) centrifugation i ka wā o ka hana.
Manaʻo: E hana ma ka lumi wela (15-25 ° C) i ke kaʻina holoʻokoʻa, mai ʻauʻau hau a centrifuge i nā haʻahaʻa haʻahaʻa.
2. Ka mālama pono ʻole ʻana i ka laʻana a i ʻole ka nui o ka manawa e mālama ai i ka laʻana.
Manaʻo Manaʻo: E kūʻai i nā laʻana ma -80 °C a i ʻole i loko o ka hau hau i loko o ka wai hau a pale i ka hoʻohana pinepine ʻana i ka hau hau;e ho'āʻo e hoʻohana i ka ʻiʻo hou a i ʻole nā pūnaewele moʻomeheu no ka unuhi ʻana i ka RNA.
3. lawa ole la'ana lysis.
Manaʻo Manaʻo: I ka wā e hoʻohui ai i ka ʻiʻo, e hōʻoia i ka hoʻomaʻemaʻe ʻia ʻana o ka ʻiʻo a ua hoʻokaʻawale ʻia nā mea kikoo e wehewehe i ka hoʻokuʻu ʻana o RNA.
4. ʻAʻole i hoʻohui pono ʻia ka eluent.
Manaʻo: E hōʻoia i ka RNase-Free ddH2Hoʻohui ʻia ʻo O i kahi dropwise i ka waena o ka membrane kolamu hoʻomaʻemaʻe.
5. ʻAʻole i hoʻohui ʻia ka leo kūpono o ka ethanol piha i ka Buffer RL2 a i ʻole Buffer RW2.
Manaʻo Manaʻo: E hahai i nā kuhikuhi, e hoʻohui i ka leo kūpono o ka ethanol piha i ka Buffer RL2 a me Buffer RW2 a hui maikaʻi ma mua o ka hoʻohana ʻana i ka pahu.
6. ʻAʻole kūpono ke ʻano o ka laʻana.
Manaʻo: E hoʻohana i ka 10-20 mg o ka ʻiʻo a i ʻole (1-5) × 106nā pūnaewele no 500 μl buffer RL1, no ka mea, hiki i ka hoʻohana ʻana i ka ʻiʻo nui ke hopena i ka hōʻemi ʻana i ka RNA extraction.
7. Ka nui elution kūpono ʻole a i ʻole ka elution piha ʻole.
Manaʻo: ʻO ka nui elution o ke kolamu hoʻomaʻemaʻe ʻo 50-200 μl;inā ʻaʻole ʻoluʻolu ka hopena elution, pono ia e hoʻolōʻihi i ka manawa kau wela o ka lumi ma hope o ka hoʻohui ʻana i ka RNase-Free ddH preheated.2ʻO, e laʻa no 5-10 min.
8. He koena ethanol ka kolamu hoʻomaʻemaʻe ma hope o ka holoi ʻana o Buffer RW2.
Manaʻo Manaʻo: Inā loaʻa ke koena ethanol ma hope o ka holoi ʻana o Buffer RW2, ʻo ka centrifugation paipu ʻole no 1min, hiki ke hoʻonui ʻia ka manawa no ka hana centrifugation pahu ʻole i 2min, a i ʻole ke kolamu hoʻomaʻemaʻe hiki ke kau ʻia ma ka lumi wela no 5 min e wehe pono i ke koena ethanol.
Hoʻohaʻahaʻa ʻia ka RNA hoʻomaʻemaʻe
ʻO ka maikaʻi o ka RNA i hoʻomaʻemaʻe ʻia e pili ana i nā mea e like me ka mālama ʻana i ka laʻana, RNase contamination, a me ka manipulation, etc.
1. ʻAʻole mālama ʻia nā ʻāpana kiko i ka manawa.
Manaʻo Manaʻo: Inā ʻaʻole hoʻohana ʻia nā laʻana a i ʻole nā pūnaewele i ka manawa kūpono ma hope o ka hōʻiliʻili ʻana, e mālama koke i ka cryopreserve ma -80 °C a i ʻole ka wai nitrogen.No ka unuhi ʻana i ka RNA, e hoʻohana i kahi ʻiʻo i lawe ʻia a i ʻole ka laʻana cell i ka wā hiki.
2. ʻO ka hoʻoheheʻe hou ʻia ʻana o nā laʻana kiko.
Manaʻo Manaʻo: I ka wā e mālama ai i nā laʻana ʻiʻo, ʻoi aku ka maikaʻi e ʻoki ʻia i mau ʻāpana liʻiliʻi no ka mālama ʻana, a e wehe i kekahi o nā ʻāpana i ka wā e hoʻohana ai ia mau mea e pale aku ai i ka hoʻoheheʻe pinepine ʻana o ka hāpana a me ka hōʻino ʻana o RNA.
3. Hoʻokomo ʻia ʻo RNase a ʻaʻole hoʻohana i nā mīkina lima hoʻolele, masks, etc. i ka wā o ka hana.
Manaʻo Manaʻo: Hana maikaʻi ʻia nā hoʻokolohua RNA extraction ma nā keʻena hoʻoponopono RNA kaʻawale a holoi ʻia ka papaʻaina ma mua o ka hoʻokolohua.
E hoʻohana i nā mīkina lima a me nā maka i ka wā o ka hoʻokolohua e hōʻemi i ka hōʻemi ʻana o RNA ma muli o ka hoʻokomo ʻana o RNase.
4. Ho'ohaumia 'ia nā reagents me RNase i ka wā e ho'ohana ai.
Manaʻo Manaʻo: E hoʻololi me kahi Animal Total RNA Isolation Kit no nā hoʻokolohua pili.
5. ʻO nā paipu centrifuge, nā ʻōlelo aʻoaʻo, a me nā mea ʻē aʻe i hoʻohana ʻia i ka RNA manipulation ua haumia me RNase.
Manaʻo Manaʻo: E hōʻoia i ka RNase-Free nā paipu centrifuge, nā ʻōlelo aʻoaʻo, nā pipette, a me nā mea ʻē aʻe i hoʻohana ʻia i ka unuhi RNA.
Hoʻopili ka RNA i hoʻomaʻemaʻe ʻia i nā hoʻokolohua ma lalo
Hoʻomaʻemaʻe ʻia ʻo RNA e ke kolamu hoʻomaʻemaʻe, inā ʻoi aku ka nui o nā ion paʻakai, ʻoi aku ka nui o ka protein ma lalo o ka hoʻokolohua, e like me: reverse transcription, Northern Blot et al.
1. He koena iona paakai ko ka RNA i hooleiia.
Manaʻo Manaʻo: E hōʻoia ua hoʻohui ʻia ka nui kūpono o ka ethanol i ka Buffer RW2 a hana i 2 holoi kolamu hoʻomaʻemaʻe ma ka wikiwiki centrifugal i hōʻike ʻia no ka hana;inā loaʻa kekahi koena ion paʻakai, waiho i ke kolamu hoʻomaʻemaʻe iā Buffer RW2 no 5 min ma ka lumi wela a hana centrifugation e hoʻonui i ka wehe ʻana o ka paʻakai.
2. Ke koena ethanol i loko o ka RNA i hoʻoheheʻe ʻia.
Manaʻo Manaʻo: E hōʻoia ma hope o ka holoi ʻana i ka pahu RW2 holoi, e hana i ka hana centrifugation paipu ʻole ma ka wikiwiki centrifugation i hōʻike ʻia no ka hana, e hoʻonui i ka manawa o ka hana centrifugation pahu ʻole i 2 min inā he koena ethanol, a waiho paha i ka lumi wela no 5 m.
