E hoʻokumu i ka SOP hoʻokolohua PCR e hoʻohālikelike i ka ʻano o nā limahana hoʻokolohua.
Mālama pono ka mea hoʻokolohua i nā kaʻina hana, a hōʻemi i ka pollution PCR i hiki ke kumu ʻia e nā kumu kanaka a i ʻole e pale i ka hiki ʻana mai o ka pollution.Eia kekahi, pono e loaʻa i ka mea hoʻokolohua ka ʻike ʻoihana kūpono a me nā mākau, e komo pū me ka mākaukau i ka hana ʻana i nā lako pili, ka wehewehe ʻana i ke kaʻina hana holoʻokoʻa, ka hoʻomaʻamaʻa ʻana i nā ʻano lapaʻau o ka contamination a me nā ʻano hoʻokele maikaʻi o ka lab, a hiki ke wehewehe pololei i nā hopena hōʻike.
E hoʻokumu i kahi keʻena PCR maʻamau.
Hoʻokaʻawale ʻia ke keʻena PCR i ʻehā mau wahi ma ke kumu, ʻo ia ka wahi hoʻomākaukau reagent, wahi e hoʻopili ai i ka laʻana, wahi hoʻonui, a me kahi wahi loiloi huahana amplification.ʻO nā wahi mua ʻelua he mau wahi pre-amplification, a ʻo nā wahi hope ʻelua he mau wahi ma hope o ka hoʻonui ʻana.Pono e hoʻokaʻawale loa ʻia ka ʻāpana pre-amplification a me ka post-amplification zone.ʻO nā mea hoʻokolohua, nā reagents, ka pepa hoʻopaʻa, nā penikala, nā mea hoʻomaʻemaʻe, a me nā mea ʻē aʻe, hiki ke kahe wale mai ka wahi ma mua o ka hoʻonui ʻana i ka wahi post-amplification, ʻo ia hoʻi, mai ka wahi hoʻomākaukau reagent → wahi hana hoʻohālike → wahi hoʻonui → wahi hoʻonui ʻia huahana, ʻaʻole pono e kahe i hope.Pono e kahe ka ea i loko o ke keʻena hana mai kahi pre-amplification a i ka post-amplification area, ʻaʻole e kahe i hope.Hōʻike ʻia ka hoʻolālā ʻoihana PCR kūpono ma lalo nei:
Kiʻi A: ʻO ke ʻano hoʻonohonoho hoʻonohonoho PCR kūpono me ke kaomi ʻino i loko o ka lumi pale
Kiʻi B: Ke ʻano hoʻonohonoho hoʻonohonoho PCR kūpono me ke kaomi maikaʻi i loko o ka lumi pale
ʻO nā kiʻi hoʻonohonoho hoʻonohonoho PCR i hāʻawi ʻia ma ke Kiʻi A a me ke Kiʻi B he ʻano hoʻonohonoho maikaʻi loa, a hiki i ka hale hana me nā kūlana ke kuhikuhi i kēia ʻano no ka hoʻolālā ʻana.No nā laboratories maʻamau, ua ʻōlelo ʻia e hiki ke hoʻokaʻawale ʻia ka wahi PCR amplification a me ka ʻāpana ʻikepili huahana, a e hoʻemi ʻia ka wehe ʻana o ka uhi e like me ka hiki i ka wahi hoʻomākaukau hoʻohālike a me ka wahi hoʻonui PCR.E hoʻomanaʻo: ʻAʻole loa e lawe ʻia nā huahana a me nā lako hoʻāʻo i loko o ka wahi loiloi huahana mai ka lawe ʻana i ka wahi hoʻomākaukau hoʻohālike a me ka wahi hoʻonui PCR.
Inā hana wale ke keʻena hana PCR i ka ʻike a me ka ʻike ʻana, pono e hoʻohana i ka PCR quantitative fluorescent ma kahi o PCR maʻamau.
Hiki ke hōʻiliʻili ʻia nā hopena ʻike PCR fluorescence quantitative a nānā ʻia e nā hōʻailona fluorescence, no laila ʻaʻohe pono e wehe i ka uhi no ka electrophoresis ma hope o ka hopena, ka mea e pale aku ai i ka hoʻohaumia ʻana o ka huahana PCR i hoʻokumu ʻia e ka leakage o nā huahana hopena e hana i nā aerosol.Inā ʻoe e hoʻonui i ka nui o ka wehe ʻana o ka pāpale i ka wā o ka hoʻouka ʻana o ka electrophoresis gel, hiki ke hoʻomake ʻia ka aerosol.Manaʻo ʻia e paipai i ka hoʻohana ʻana i ka PCR quantitative a hoʻololi mālie i ka PCR qualitative.
Hoʻohana ʻia ka ʻōnaehana contamination huahana UNG anti-PCR no ka hopena PCR.
Hoʻohana ka ʻōnaehana i ka dUTP ma kahi o ka dTTP.Ma hope o ka pane ʻana o ka PCR, hoʻohui ʻia nā huahana PCR a pau (nā ʻāpana DNA) me ka dUTP;i ka pōʻai aʻe o ka pane PCR, hoʻokomo ʻia ka enzyme UNG i hoʻohui ʻia i ka ʻōnaehana ma 37 ° C no 5 mau minuke ma mua o ka PCR, hiki ke hoʻohaʻahaʻa i nā ʻāpana DNA āpau i loaʻa i ka dUTP, a laila hana i ka hopena PCR.Hiki i kēia ke hoʻopau loa i ka ʻino aerosol i hoʻokumu ʻia e nā huahana PCR.Hōʻike ʻia ka hopena ma ke kiʻi ma lalo nei:
'Ōlelo Aʻo: No ka PCR moʻo pololei, hiki iā ʻoe ke koho i nā huahana moʻo o ka ʻōnaehana contamination huahana anti-PCR o Foregene.Manaʻo
No nā laboratories e hana ana i ka hoʻāʻo genotyping nui, ua paipai ikaika ʻia e hoʻohana i ka ʻōnaehana contamination huahana UNG anti-PCR no ka hoʻāʻo ʻana i nā reagents ma kahi o ke kūkulu ʻana i nā laboratories kūpono.
Hoʻomanaʻo: ʻAʻole hiki i ka hoʻohana ʻana i kēia ʻōnaehana ke wehe i ka palaka huahana PCR i hana ʻia.No laila, pono e hoʻohana ʻia ka ʻōnaehana UNG i ka hoʻomaka ʻana o ka hoʻāʻo kūpono, a pono e hoʻohana ʻia ka ʻōnaehana UNG no ka hoʻonui ʻana i ka PCR, i mea e pale ai i ka haumia o nā huahana PCR False positive.
Manaʻo ʻia e hoʻohana i ka ʻōnaehana PCR-UNG Direct o Foregene i ka wā e hana ana i ka hoʻāʻo nui, e like me:
Mea kanu Leaf Direct PCR Kit-UNG；
Mea kanu ʻano PCR Kit-UNG；
Kīkoi PCR kiʻi kiʻi holoholona holoholona-UNG；
Kit PCR pololei huelo iole;
ʻO Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.
ʻO kēia pūʻulu kits mai ForegeneʻAʻole hiki iā ia ke hana i ka ʻike PCR me ka wikiwiki a me ka nui, akā hiki ke pale a hoʻopaʻa i ka hoʻohaumia huahana PCR.
Ka manawa hoʻouna: Mar-19-2021
