Ke hilinaʻi nei mākou i ka ikaika ʻenehana paʻa a hana mau i nā ʻenehana loea e hoʻokō i ka koi o Supply OEM China Rt-PCR Mix noQpcr, 'O ka hui 'ana me 'oe, e ulu a'e ka hau'oli i ka la apopo!
Ke hilinaʻi nei mākou i ka ikaika ʻenehana paʻa a hoʻomau i ka hana ʻana i nā ʻenehana loea e hoʻokō i ke koi oKina Taq DNA Polymerase, Qpcr, I kēia manawa, hoʻolako mākou i nā mea kūʻai aku me kā mākou mau hoʻonā koʻikoʻi A ʻo kā mākou ʻoihana ʻaʻole wale ka "kūʻai" a me ka "kūʻai aku", akā e nānā pū i nā mea hou aku.Manaʻo mākou e lilo i mea hoʻolako kūpaʻa a me ka mea hana lōʻihi ma Kina.I kēia manawa, manaʻolana mākou e lilo i mau hoaaloha me ʻoe.

Nā wehewehe

Hoʻohana kēia kit i kahi ʻōnaehana lysis buffer kūʻokoʻa e hiki ke hoʻokuʻu koke i ka RNA mai nā laʻana cell moʻomeheu no nā hopena RT-qPCR, a laila e hoʻopau i ke kaʻina hoʻomaʻemaʻe RNA hoʻopau manawa a paʻakikī.Hiki ke loaʻa ka template RNA i loko o 7 mau minuke.Hiki i ka 5×Direct RT Mix a me ka 2×Direct qPCR Mix-SYBR reagents i hāʻawi ʻia e ka kit hiki ke loaʻa koke i nā hopena PCR quantitative maoli.

ʻO 5 × Direct RT Mix a me 2 × Direct qPCR Mix-SYBR he ikaika ka hoʻomanawanui inhibitor, a hiki ke hoʻohana ʻia ka lysate o nā laʻana e like me ke kumu hoʻohālike no RT-qPCR pololei.Aia kēia pahu i ka RNA high-affinity Foregene reverse transcriptase, a me Hot D-Taq DNA polymerase, dNTPs, MgCl₂, pale pale, PCR optimizer a stabilizer.

Nā kikoʻī

200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns

Nā ʻāpana pahu

Nā hiʻohiʻona & pono

■ Maʻalahi a maikaʻi : me ka ʻenehana Cell Direct RT, hiki ke loaʻa nā laʻana RNA i loko o 7 mau minuke.

■ He liʻiliʻi ka noi hāpana, hiki ke hoʻāʻo ʻia ma kahi haʻahaʻa he 10.

■ Kiʻekiʻe throughput: hiki iā ia ke ʻike koke i ka RNA i loko o nā cell moʻomeheu i 384, 96, 24, 12, 6-well plates.

■ Hiki i ka DNA Eraser ke wehe koke i nā genome i hoʻokuʻu ʻia, e hoʻemi nui i ka hopena ma nā hopena hoʻokolohua ma hope.

■ ʻOi aku ka maikaʻi o ka ʻōnaehana RT-PCR i ʻoi aku ka maikaʻi a me ka PCR i ʻoi aku ka maikaʻi, a ʻoi aku ke kūpaʻa ʻana i nā mea hoʻopaneʻe hopena RT-qPCR.

Ke noi pahu

Ka laulā o ka hoʻohana ʻana: nā cell moʻomeheu.

- Hoʻokuʻu ʻia ʻo RNA e ka laʻana lysis: pili wale i ka template RT-qPCR o kēia pahu.

- Hiki ke hoʻohana ʻia ke kit no nā kumu aʻe: ka nānā ʻana i ka hōʻike ʻana o ke ʻano, ka hōʻoia o ka hopena silencing gene-mediated gene siRNA, ka nānā ʻana i ka lāʻau, etc.

Diagram

Ka mālama ʻana a me ka mālama ʻana

Pono e mālama ʻia ka ʻāpana I o kēia pahu ma 4 ℃;Pono e mālama ʻia ka ʻāpana II ma -20 ℃.

Pono e mālama ʻia ka Foregene Protease Plus II ma 4 ℃, mai maloʻo ma -20 ℃.

Pono e mālama ʻia ka Reagent 2×Direct qPCR Mix-SYBR ma -20 ℃ i ka pōʻeleʻele;inā hoʻohana pinepine ʻia, hiki ke mālama ʻia ma 4 ℃ no ka mālama pōkole (hoʻohana i loko o 10 mau lā). Ke hilinaʻi nei mākou i ka ikaika ʻenehana paʻa a hoʻomau i ka hana ʻana i nā ʻenehana loea e hoʻokō i ke koi o Supply OEM China Rt-PCR Mix noQpcr, 'O ka hui 'ana me 'oe, e ulu a'e ka hau'oli i ka la apopo!
Hoʻolako OEMKina Taq DNA Polymerase, Qpcr, I kēia manawa, hoʻolako mākou i nā mea kūʻai aku me kā mākou mau hoʻonā koʻikoʻi A ʻo kā mākou ʻoihana ʻaʻole wale ka "kūʻai" a me ka "kūʻai aku", akā e nānā pū i nā mea hou aku.Manaʻo mākou e lilo i mea hoʻolako kūpaʻa a me ka mea hana lōʻihi ma Kina.I kēia manawa, manaʻolana mākou e lilo i mau hoaaloha me ʻoe.

Nā loina hoʻolālā mua PCR manawa maoli

Kuhikuhi i mua a me ke kumu mua

No Real Time PCR, he mea nui ka hoʻolālā mua.Pili nā kumu mua i ka kikoʻī a me ka pono o ka hoʻonui ʻana i ka PCR, a hiki ke hoʻolālā ʻia me ka pili ʻana i nā kumu aʻe:

Ka lōʻihi mua: 18-30bp.

Maʻiʻo GC: 40-60%.

Waiwai Tm: Hiki i nā polokalamu hoʻolālā kumu, e like me Primer 5, ke hāʻawi i ka waiwai Tm o ke kumu.Pono e kokoke loa na koina Tm o na kumu mua a me lalo.Hiki ke hoʻohana ʻia ke kumu helu Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Ke hana ʻia ka PCR, koho ʻia ka wela ma lalo o ka waiwai Tm kumu mua o 5 °C ma ke ʻano he wela annealing (hiki ke hoʻonui ʻia ka hoʻonui ʻana o ka mahana annealing i ka kikoʻī o ka hopena PCR).

Nā mea mua a me nā huahana PCR:

ʻOi aku ka maikaʻi o ka loaʻa ʻana o ka lōʻihi o ka huahana PCR amplification primer 100-150bp.

Pono e pale ʻia nā kumu mua o ka hoʻolālā ʻana ma ka ʻāpana kūkulu lua o ka template i ka mea hiki.

Hōʻalo i ka hoʻokumu ʻia ʻana o nā kumu hoʻohui ʻelua a ʻoi aʻe paha ma waena o nā welau 3′ o nā kumu mua a me lalo.

ʻAʻole hiki ke loaʻa ke kumu kumu kumu 3′ me 3 mau G a i ʻole C.

ʻAʻole hiki i nā primers ke loaʻa nā hale hoʻohui, inā ʻaʻole e hoʻokumu ʻia kahi ʻano lauoho lauoho, e pili ana i ka hoʻonui PCR.

Pono e puunaue like 'ia ka ATCG e like me ka hiki ma ke ka'ina mua, a e pale 'ia ke kumu 3' e like me T.

Pākuʻi 1: Pūʻulu hoʻohui ʻāpana ʻāpana o ka Pūnaewele RT-qPCR Kit

1.ʻO ka hoʻonā cell Lysis